Публикации в научных журналах

Результаты исследований доклинической и клинической эффективности и безопасности препаратов компании и их компонентов опубликованы в российских и зарубежных рецензируемых научных журналах, в том числе индексируемых международными библиографическими базами.

Перечень публикаций

Insights into the mechanism of action of highly diluted biologics
Понимание сущности механизма действия высокоразбавленных биологических препаратов
Abstract
The therapeutic use of Abs in cancer, autoimmunity, transplantation, and other fields is among the major biopharmaceutical advances of the 20th century. Broader use of Ab-based drugs is constrained because of their high production costs and frequent side effects. One promising approach to overcome these limitations is the use of highly diluted Abs, which are produced by gradual reduction of an Ab concentration to an extremely low level. This technology was used to create a group of drugs for the treatment of various diseases, depending on the specificity of the used Abs. Highly diluted Abs to IFN-γ (hd-anti–IFN-γ) have been demonstrated to be efficacious against influenza and other respiratory infections in a variety of preclinical and clinical studies. In the current study, we provide evidence for a possible mechanism of action of hd-anti–IFN-γ. Using high-resolution solution nuclear magnetic resonance spectroscopy, we show that the drug induced conformational changes in the IFN-γ molecule. Chemical shift changes occurred in the amino acids located primarily at the dimer interface and at the C-terminal region of IFN-γ. These molecular changes could be crucial for the function of the protein, as evidenced by an observed hd-anti–IFN-γ–induced increase in the specific binding of IFN-γ to its receptor in U937 cells, enhanced induced production of IFN-γ in human PBMC culture, and increased survival of influenza A–infected mice.

Авторский перевод

Аннотация
Терапевтическое использование антител в онкологии, лечении аутоиммунных заболеваний, трансплантации и других областях является одним из основных достижений биофармацевтики 20-го века. Более широкое применение препаратов на основе антител ограничено из-за их высокой стоимости производства и частых побочных эффектов. Одним из перспективных подходов к преодолению этих ограничений является использование высоких разведений антител, которые получают путем постепенного снижения концентрации антител до крайне низкого уровня. Эта технология была использована для создания группы препаратов для лечения различных заболеваний в зависимости от специфичности используемых антител. Ранее была показана эффективность высоких разведений антител к ИФНγ (СВР-АТ-ИФНγ) в отношении гриппа и других респираторных инфекций в различных доклинических и клинических исследованиях. В данном исследовании мы приводим доказательства возможного механизма действия СВР-АТ-ИФНγ. С помощью ЯМР-спектроскопии высокого разрешения в жидкостях было показано, что препарат вызывает конформационные изменения в молекуле ИФНγ. Наблюдались изменения в химических сдвигах соответствующих аминокислотам, расположенным преимущественно в интерфейсе димера и в С-концевой области ИФНγ. Эти молекулярные изменения могут иметь решающее значение для функции белка, о чем свидетельствуют наблюдаемое вызванное СВР-АТ-ИФНγ увеличение специфического связывания ИФНγ с его рецептором в клетках U937, усиление индуцированной секреции ИФНγ в культуре мононуклеарных клеток периферической крови человека и увеличение выживаемости инфицированных гриппом A мышей.
Результаты исследования влияния анаферона детского на жизненный цикл вируса гриппа A/H1N1 in vitro
Аннотация
Цель исследования - изучение возможного прямого влияния препарата «Анаферон детский» на жизненный цикл вируса гриппа А в процессе развития инфекции, а также дозозависимости противовирусного эффекта in vitro.
Методика. Исследование противовирусной активности препарата «Анаферон детский» in vitro было проведено с использованием культуры клеток MDCK (Madin Darby canine kidney) и эталонных штаммов вируса гриппа A (H1N1) pdm09: A/California/07/09 и А/California/04/09, полученных от ВОЗ. Использовались методы оценки подавления Анафероном детским вирусной репликации (по результатам иммуноферментного анализа по определению экспрессии внутренних белков NP и M1 вируса гриппа А) и его влияние на ультраструктурные особенности морфогенеза вируса гриппа методом электронной микроскопии. В качестве положительного контроля был использован Озельтамивир карбоксилат в концентрации 10 мкМ. Для мониторинга валидности экспериментальной модели в работе использовали клетки, зараженные вирусом без добавления экспериментальных образцов (контроль вируса), а также интактные клетки (клеточный контроль).
Результаты. В ходе исследования показан дозозависимый противовирусный эффект препарата «Анаферон детский» для 3 тестируемых разведений - 1/8, 1/12, 1/16. Методом электронной микроскопии показано, что применение препарата «Анаферон детский» при сравнении с контрольным образцом влияло на процесс почкования вирионов.
Заключение. Впервые показана дозозависимость противовирусного действия препарата «Анаферон детский», а также подтверждена его эффективность в отношении двух штаммов вируса пандемического гриппа А/H1N1. Документировано, что применение препарата «Анаферон детский» нарушает жизненный цикл вируса гриппа А. Механизмы развития такого эффекта требуют дополнительного изучения, однако можно предположить их связь с ИФН-индуцирующими свойствами препарата «Анаферон детский», так как было показано, что в начале лечения вирусной инфекции препарат вызывает индукцию синтеза белков системы интерферонов.
Основные принципы профилактики острых респираторных инфекций у часто болеющих детей
Резюме статьи

На основании изучения клинико-лабораторных особенностей острых респираторных заболеваний и частоты развития госпитальных инфекций у часто болеющих детей, в сравнении с редко болеющими, в детских стационарах Санкт-Петербурга были разработаны основные принципы профилактики респираторных инфекций. Показана эффективность средств этиотропной и иммунореабилитирующей терапии для плановой и экстренной профилактики у разных групп часто болеющих детей.

Профилактика и лечение острых респираторных инфекций у детей с бронхиальной астмой

Аннотация
Цель исследования: оценка эффективности Анаферона детского (АнД) в профилактике и лечении повторных ОРВИ у детей с бронхиальной астмой (БА).
Дизайн: рандомизированное двойное слепое плацебо-контролируемое клиническое исследование. 
Материал и методы. Дети (возраст - 1-5 лет; течение БА - легкое или среднетяжелое) были рандомизированы в основную группу (n = 100; 3 месяца получали АнД по стандартной профилактической схеме с временным переводом на стандартную лечебную схему в случае развития ОРВИ) и контрольную группу (n = 100; получали плацебо по аналогичным схемам).
Результаты. В основной группе болели ОРВИ 40 детей, из них 20 дважды (всего 60 ОРВИ), а в контроле - 76 детей, из них 36 дважды и 10 детей по 3 раза (132 ОРВИ). Средняя продолжительность 1 и 2-го эпизодов ОРВИ составила в основной группе 5,7 ± 0,4 и 5,2 ± 0,5 дня, в контроле - 9,4 ± 0,6 и 9,1 ± 0,8 дня соответственно. Обострение БА (оБА) перенесли 20% детей из основной и 64% детей из контрольной группы. Заключение. Лечебно-профилактическое применение АнД у детей с БА по сравнению с плацебо понизило заболеваемость ОРВИ, в том числе повторную, сократило продолжительность ОРВИ и способствовало снижению частоты и продолжительности вирусиндуцированных оБА у детей, что улучшило контроль БА.

Оценка эффективности повторных профилактических и лечебных курсов анаферона детского для разработки рациональных схем применения при ОРВИ у детей.

Аннотация
Острые респираторные вирусные инфекции (ОРВИ) и грипп в педиатрической практике по-прежнему являются самыми распространенными заболеваниями, на долю которых у детей приходится до 90% всей инфекционной патологии. Известно, что наиболее часто ОРВИ развиваются у детей, посещающих детские дошкольные учреждения (ДДУ) - именно эта категория детей характеризуется частым возникновением повторных эпизодов ОРВИ (рекуррентные инфекции). Применение Анаферона детского эффективно для лечения и профилактики ОРВИ. Эффективность Анаферона детского при проведении вторичных профилактических и лечебных курсов не снижается.

Исследование эффективности Анаферона детского на мышах, зараженных пандемическим вирусом гриппа A(H1N1/09)V
Аннотация

ЦЕЛЬ: Изучение эффективности анаферона детского у мышей, зараженных пандемическим вирусом гриппа A(H1N1/09)v.
МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ: Использовали штамм вируса гриппа A/California/07/2009 (H1N1)v. Были изучены три группы мышей BALB/c, интраназально зараженных вирусом гриппа. Первая группа получала раствор Анаферона детского в течение 5 дней до и в течение 8 дней после заражения, вторая группа получала Тамифлю в течение 5 дней после заражения. Мыши в контрольной группе перорально получали дистиллированную воду.
РЕЗУЛЬТАТЫ: Было показано, что Анаферон детский, применяемый в качестве профилактики и для лечения, у мышей, интраназально зараженных 100% инфекционной дозой штаммом вируса гриппа A/ California/07/2009 (H1N1)v, обладал противовирусным воздействием, что проявлялось в виде 10-кратного снижения репродукции вируса гриппа в легких зараженных мышей по сравнению с контрольной группой при измерении через 4, 6 и 8 дней после заражения.
ЗАКЛЮЧЕНИЕ: Применение анаферона детского до и после заражения вирусом гриппа A(H1N1/09)v было не менее эффективно, чем применение Тамифлю, после заражения

Use of piezoelectric immunosensors for detection of interferon-gamma interaction with specific antibodies in the presence of released-active forms of antibodies to interferon-gamma
Применение пьезоэлектрических иммуносенсоров для выявления взаимодействия интерферона-гамма со специфическими антителами в присутствии релиз-активных форм антител к интерферону-гамма
Abstract

In preliminary ELISA studies where released-active forms (RAF) of antibodies (Abs) to interferon-gamma (IFNg) were added to the antigen-antibody system, a statistically significant difference in absorbance signals obtained in their presence in comparison to placebo was observed. A piezoelectric immunosensor assay was developed to support these data and investigate the effects of RAF Abs to IFNg on the specific interaction between Abs to IFNg and IFNg. The experimental conditions were designed and optimal electrode coating, detection circumstances and suitable chaotropic agents for electrode regeneration were selected. The developed technique was found to provide high repeatability, intermediate precision and specificity. The difference between the analytical signals of RAF Ab samples and those of the placebo was up to 50.8%, whereas the difference between non-specific controls and the placebo was within 5%–6%. Thus, the piezoelectric immunosensor as well as ELISA has the potential to be used for detecting the effects of RAF Abs to IFNg on the antigen-antibody interaction, which might be the result of RAF’s ability to modify the affinity of IFNg to specific/related Abs.



Авторский перевод

Аннотация

В предварительных анализах методом ИФА, в которых релиз-активные формы (РАФ) антител (Ат) к интерферону-гамма (ИФНγ) добавляли к системе антиген-антитело, отмечалось статистически значимое различие поглощения, полученного в их присутствии, по сравнению с плацебо. Анализ с использованием пьезоэлектрических иммуносенсоров был разработан с целью подтверждения этих данных и изучения влияния РАФ Ат к ИФНγ на специфическое взаимодействие между Ат к ИФНγ и ИФНγ. Были выбраны экспериментальные условия и подобраны оптимальное покрытие, условия определения и подходящие хаотропные вещества для регенерации электродов. Было доказано, что разработанный метод обладает высокой сходимостью, средней прецизионностью и специфичностью. Различия между аналитическими сигналами образцов РАФ Ат и сигналами плацебо составляли до 50,8%, тогда как различие между неспецифическими контролями и плацебо составляло 5-6%. Таким образом, пьезоэлектрические иммуносенсоры, а также ИФА могут быть использованы для выявления влияния РАФ Ат к ИФНγ на взаимодействие антиген-антитело, которое может быть следствием способности РАФ модифицировать аффинность ИФНγ к специфическим/сопряженным Ат.

Dose-dependent antiviral activity of released-active form of antibodies to interferon-gamma against influenza A/California/07/09(H1N1) in murine model
Дозозависимая противовирусная активность релиз-активной формы антител к интерферону-гамма на модели мышей инфицированных вирусом гриппа A/California/07/09(H1N1)
Abstract

The assessment of dose-response is an essential part of drug development in terms of the determination of a drug's effective dose, finding the safety endpoint, estimation of the pharmacokinetic profile, and even validation of drug activity, especially for therapeutic agents with a principally novel mechanism of action. Drugs based on released-active forms of antibodies are a good example of such a target. In this study, the efficacy of the antiviral drug Anaferon for children (released-active form of antibodies to interferon-gamma) was tested in a dose-dependent manner (at doses of 0.13, 0.2, 0.4, 0.8 ml/mouse/day) in a murine model of acute pneumonia induced by influenza virus pandemic strain A/California/07/09 (H1N1). Administration of the drug at the two highest doses led to: a reduction in the virus infectious titer in lung tissue up to 4.2 lgEID50/20 mg of tissue; infected animals' life prolongation up to 6.7 days; an increase in the survival rate of up to 40% and a decrease in morphological signs of inflammation when compared to the control animals. In this study, the dose-response effect of Anaferon for Children was demonstrated on mice for the first time. This finding is especially important for drugs with a principally novel mechanism of action like drugs based on released-active forms of antibodies. J. Med. Virol. 89:759-766, 2017.



Авторский перевод

Аннотация

Оценка дозозависимости является неотъемлемой частью разработки препарата для определения его эффективной дозы, нахождения конечной точки безопасности, оценки фармакокинетического профиля и даже валидации активности препарата, особенно в отношении лекарственных средств с принципиально новым механизмом действия. Препараты на основе релиз-активных форм антител являются наглядным примером такой цели. В данном исследовании эффективность противовирусного препарата Анаферон детский (релиз-активная форма антител к интерферону-гамма) была изучена в зависимости от дозы (при дозах 0,13, 0,2, 0,4, 0,8 мл/мышь/сутки) на модели мышей с острой пневмонией, индуцированной пандемическим штаммом вируса гриппа A/California/07/09 (H1N1). Применение препарата в двух максимальных дозах приводило к снижению инфекционного титра вируса в ткани легких до 4,2 lgEID50/20 мг ткани; увеличению продолжительности жизни зараженных животных на 6,7 дней; увеличению выживаемости на 40% и уменьшению морфологических признаков воспаления по сравнению с контрольными животными. В данном исследовании дозозависимость эффектов Анаферона детского был показан на мышах впервые. Полученные результаты имеют особо важное значение для препаратов с принципиально новым механизмом действия, включая препараты на основе релиз-активных форм антител. J. Med. Virol. 89:759-766, 2017.

Иммунотропные свойства анаферона и анаферона детского

Аннотация
Препараты анаферон и анаферон детский, созданные на основе релиз-активных антител к интерферону гамма (Р-А антител к ИФН-гамма), эффективны в лечении целого ряда вирусных инфекций. В серии доклинических исследовании, проведенных в ведущих российских и зарубежных научных организациях, были выявлены иммуномодулирующие (иммунотропные) свойства препаратов, обзор которых представлен в настоящей статье. Анаферон и анаферон детский стимулируют гуморальный и клеточный иммунный ответ, повышают фагоцитарную активность нейтрофилов и макрофагов. Ключевым механизмом иммунотропного действия Р-А антител к ИФН-гамма является влияние на систему интерферонов, в частности на ИФН-гамма, и функционально сопряженных с ней цитокинов, приводящее к нормализации функциональной активности естественных факторов иммунной защиты и к усилению противовирусного действия. Благодаря широкому спектру иммунотропной активности препараты анаферон и анаферон детский более 10-ти лет успешно применяются в лечении и профилактике заболеваний, в основе которых лежат нарушения функционального состояния иммунной системы.

Отечественные и зарубежные исследования анаферона детского: эффективность, безопасность и опыт применения (обзор литературы)

Аннотация
Интерес к проблеме острых респираторных вирусных инфекций (ОРВИ) у детей не снижается и определяется их широким распространением, принадлежностью в большинстве случаев к «неуправляемым инфекциям» и наличием возрастных ограничений в использовании противовирусных препаратов. В настоящее время в Российской Федерации делается акцент на использование в клинической практике лекарственных средств отечественного производства. Инновационным препаратом является Анаферон детский, разработанный российской фармацевтической компанией НПФ ООО «Материа Медика Холдинг» и зарегистрированный в России в 2002 г. 
Цель обзора – систематизировать и проанализировать отечественные и зарубежные публикации о результатах доклинического и клинического изучения эффективности и безопасности препарата Анаферон детский при ОРВИ, а также других вирусных инфекций. 
Метод исследования: поисково-аналитический. 
Результаты. В обзоре представлены данные доклинических исследований, которые обосновывают механизм действия препарата на молекулярном уровне, обеспечивающий его сочетанную противовирусную и иммуномодулирующую эффективность. Полученные в эксперименте результаты подтверждены клиническими исследованиями и отражены в многочисленных научных публикациях, включая зарубежные. В обзоре приведен анализ результатов клинических исследований использования препарата у детей при ОРВИ, включая грипп. Доказано, что Анаферон детский значительно снижает продолжительность основных клинических симптомов ОРВИ и гриппа, частоту бактериальных осложнений, хорошо переносится и имеет высокий профиль безопасности. Открытое рандомизированное сравнительное исследование эффективности и безопасности Анаферона детского при гриппе по сравнению с Осельтамивиром продемонстрировало клиническую эффективность указанных препаратов. Из многочисленных публикаций следует, что Анаферон детский проявляет противовирусное действие по отношению не только к большинству вирусов, вызывающих острые респираторные вирусные инфекции, но и к вирусам герпеса, вирусам, вызывающим кишечные инфекции, вирусу клещевого энцефалита. Перечень научных публикаций по препарату составляет около 800 источников, включая более 50 публикаций на иностранных языках, в том числе в журналах с высоким индексом цитируемости.